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文章導(dǎo)讀 生物技術(shù)工業(yè)中,分離純化的成本常常占整個過程成本的60%~90%。我國生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)以傳統(tǒng)的發(fā)酵工業(yè)為主,產(chǎn)品分離純化是發(fā)酵工業(yè)重要的階段,是整個發(fā)酵生產(chǎn)線的下游,不僅決定產(chǎn)率,而且決定產(chǎn)品的質(zhì)量和安全性。
技術(shù)詳情


細(xì)胞破碎技術(shù)


       動物、植物及微生物長成的天然產(chǎn)物有胞外型和胞內(nèi)型兩種。為回收胞內(nèi)產(chǎn)物,需要利用外力破壞細(xì)胞膜和細(xì)胞壁,使細(xì)胞內(nèi)含物釋放出來,然后再進行分離純化。細(xì)胞破碎就是采用物理、化學(xué)、酶或機械的方法,利用外力在一定程度上破壞細(xì)胞壁和細(xì)胞膜,使細(xì)胞內(nèi)容物包括目的產(chǎn)物成分釋放到液相中。細(xì)胞破碎分離提純某一種蛋白質(zhì)時,首先要把蛋白質(zhì)從組織或細(xì)胞中釋放出來并保持原來的天然狀態(tài),不喪失活性。所以要采用適當(dāng)?shù)姆椒▽⒔M織和細(xì)胞破碎。不同的生物體或同一生物體的不同部位的組織,其細(xì)胞破碎的難易不一,使用的方法也不相同,如動物臟器的細(xì)胞膜較脆弱,容易破碎,植物和微生物由于具有較堅固的纖維素、半纖維素組成的細(xì)胞壁。因此,細(xì)胞破碎的目的是釋放出細(xì)胞內(nèi)含物。細(xì)胞破碎技術(shù)是提取胞內(nèi)產(chǎn)物的關(guān)鍵性步驟,是分離純化細(xì)胞內(nèi)合成的非分泌型生化物質(zhì)(產(chǎn)品)的基礎(chǔ)。生物分離技術(shù)在細(xì)胞碎片的去除,細(xì)胞胞內(nèi)物質(zhì)、蛋白質(zhì)、天然生物物質(zhì)的提取分離方面有獨特的優(yōu)勢,在生物工業(yè)上具有廣闊的應(yīng)用前景。菌體細(xì)胞破碎技術(shù)的進展為工業(yè)化分離菌體細(xì)胞和大規(guī)模生產(chǎn)胞內(nèi)物質(zhì)創(chuàng)造了技術(shù)前提。結(jié)合重組DNA技術(shù)和組織培養(yǎng)技術(shù)上的重大進展,蛋白質(zhì)可以大規(guī)模生產(chǎn)。細(xì)胞破碎率的高低決定著胞內(nèi)產(chǎn)物釋放率的高低,也決定著產(chǎn)品的收率和成本。細(xì)胞破碎率越高,胞內(nèi)產(chǎn)物釋放的越多;細(xì)胞破碎率越低,胞內(nèi)產(chǎn)物釋放的越少。因此,安全有效地提取胞內(nèi)產(chǎn)物,提高細(xì)胞破碎率,很大程度上提高了產(chǎn)品的產(chǎn)量。

       細(xì)胞破碎就是采用物理、化學(xué)、酶或機械的方法,在一定程度上破壞細(xì)胞壁和細(xì)胞膜,設(shè)法使胞內(nèi)產(chǎn)物最大程度地釋放到液相中,細(xì)胞破碎是提取胞內(nèi)產(chǎn)物的關(guān)鍵性步驟。細(xì)胞破碎技術(shù)是分離純化細(xì)胞內(nèi)合成的非分泌型生化物質(zhì)(產(chǎn)品)的基礎(chǔ)。

       細(xì)胞破碎方式可規(guī)納為機械法和非機械法兩大類。細(xì)胞破壁的方法很多,按照是否存在外加作用力,可分為機械法和非機械法。按照物理和非物理方法可分為物理法和化學(xué)法。物理方法主要有:根據(jù)破壁溫度可分為低溫物理破壁,超低溫物理破壁;根據(jù)用力情況可分為高速撞擊破壁,剪切力破壁等,非物理方法主要有化學(xué)試劑法及生物酶解法。                         

       高壓細(xì)胞破碎儀具有破碎組織、細(xì)菌、病毒、孢子及其它細(xì)胞結(jié)構(gòu),勻質(zhì)、乳化、混合、脫氣、崩解和分散、浸出和提取,加速反應(yīng)等功能,故廣泛應(yīng)用于生物、醫(yī)學(xué)、化學(xué)、制藥、食品、化妝品、環(huán)保等實驗室研究及企業(yè)生產(chǎn)。采用高壓細(xì)胞破碎法,處理量大、破碎速度較快。此過程中只發(fā)生物質(zhì)狀態(tài)的變化,而無化學(xué)反應(yīng)變化;是物質(zhì)量的分配,而不是質(zhì)的飛躍。


5-1 細(xì)胞破碎782X678.png

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