中文名稱：超活核酸酶
英文名稱：Ultra-active Nuclease
產品品牌：Minnebio?
蛋白純度：≥ 99%(SEC-HPLC)
產品貨號：MBPN01-100LP
產品規格：100KU
產品描述
Minnebio?超活核酸酶(≥99%) (Minnebio? Ultra-active Nuclease, ≥99%) 是一種來源于粘質沙雷氏菌(Serratia marcescens)的非特異性核酸內切酶，經基因工程改造在 Escherichia coli (E. coli)中表達，通過專利純化過程，在GMP規范下制備超純級廣譜核酸酶。它可在鏈內任意核苷酸間進行切割，將核酸完全消化成3至5個堿基長度的5'-單磷酸寡核苷酸，能夠在非常廣泛的條件下 (6 M urea,0.1 M Guanidine HCl,0.4% Triton X-100,0.1% SDS,1 mM EDTA,1 mM PMSF) 降解各種形式的 (雙鏈、單鏈、線狀、環狀、天然或變性) DNA和RNA，廣泛用于去除生物制品中的核酸。
本品經基因工程改造在Escherichia coli (E. coli)中表達純化，純度≥ 99%。不僅可在科學研究中降低細胞上清和細胞裂解液的粘度，提高蛋白純化效率及功能研究；還可以應用在基因治療、病毒純化、疫苗生產、蛋白和多糖類制藥工業作為宿主殘留核酸去除試劑。
酶活單位
適量酶和底物經過30分鐘培育后導致紫外光在260 nm波長處吸收△A260改變量為1.0時所需酶的量（對應于消化37μgDNA的量）被定義為一個酶活性單位。
運輸與保存方法
本產品性質及其穩定，保質期較長?？稍?20℃的含防止冷凍的溶液50%甘油中保存幾個月，凍干粉可在-20℃下保存1年或80℃下保存數年。
產品應用
本產品用途廣泛，常用于重組蛋白、病毒疫苗等生物制品中去除核酸，符合FDA關于核酸污染的處理規程
本產品可以與多種細胞細菌裂解液配合使用,去除粗提物中的核酸，降低溶液粘性，提高蛋白質產量
用于生物分析的樣品制備包括質譜、HPLC、ELISA、二維蛋白質電泳和印跡分析等。
可以有效防止細胞治療和疫苗研究中人外周血單核細胞 (PBMC) 的結團。
超活核酸酶可用于代替樣品超聲處理或其他機械剪切方法處理DNA。
1、超活核酸酶可用于處理細胞或組織的提取液,以降解生物樣品中的DNA和RNA，應用在病毒純化、疫苗生產、蛋白和多糖類制藥工業作為宿主殘留核酸去除試劑，將宿主殘留核酸降 至皮克(pg)級別從而提高生物制品功效和安全性
2、在實驗室環境下或者工業制造過程中,本品用于斷裂DNA鏈,以減少由核酸特別是分子量較大的核酸分子導致的比較大的溶液粘度。該酶與 BacReady- Protein Extraction Solution 和 RIPA LysisBuffer等蛋白抽提試劑配合使用，從而消除粗提物中的核酸，降低粘度。
3、超活核酸酶可用于處理細胞或組織的提取液,以降解生物樣品中的DNA和RNA,從而進一步消除它們對樣品分析造成的干擾,確保生物分析過程中的靈敏度和準確性。 用于生物分析的樣品制備包括質譜、HPLC、ELISA、二維蛋白質電泳和印跡分析等。提高分辨率的分離和提高樣品的回收率。例如：T細胞反應試驗需要新鮮分離的細胞來進行最佳的信號檢測。然而冷凍的PBMCs (特別是從儲存的血液中制備的PBMCs) 在解凍后往往會聚集在一起，阻止了進一步的分析。核酸酶處理步驟有助于避免由死亡細胞釋放的DNA導致的細胞聚集。
4、超活核酸酶在細胞解凍過程中,可以防止細胞結塊。例如冷凍的PBMCs (特別是從儲存的血液中制備的PBMCs) 在解凍后往往會聚集在一起,結塊形成沉淀。經過超活核酸酶處理后,有助于避免由死亡細胞釋放的DNA導致的細胞聚集現象的發生。
5、酶剪切是利用核酸酶將染色質酶切成小片段，可用于DNA結合蛋白的研究。酶促剪切不需要超聲波處理設備。酶剪切也比超聲更具侵略性，因此可以保護感興趣的表位，使其能夠被抗體識別。超活性核酸酶可用于代替樣品超聲處理或其他機械剪切處理DNA。
超活核酸酶最佳反應條件
在50 mMTris-HCl緩沖液中含有1-2 mM MgCl2, 及在pH 8-9左右和37℃條件下,培育30分鐘能取得最大DNA降解效果。超活核酸酶可以耐受相當高濃度的還原劑存在如DTT和變性劑尿素及鹽酸胍等,從而維持良好的結構狀態和進一步保持其超高的活性。因此超活核酸酶在比較寬泛,甚至是極端條件下繼續發揮其DNA降解作用。
核酸酶溶液的制備
在凍干粉的小瓶中加入去離子水,使溶液濃度達到0.2 kU to 1 kU/μL之間。用微量移液管吸取溶液并用移液管槍頭貼著管壁緩慢釋放, 沖洗粘附在在管壁上的核酸酶殘留物。如果溶液量足夠多,也可以蓋住瓶蓋, 輕輕晃動瓶子, 甚至顛倒小瓶幾次,最后用離心機使溶液聚集在瓶底。根據需要,可以用緩沖液進一步稀釋。
凈化用樣品處理
通常在含有1克細胞的溶液中加入100-500U 的超活核酸酶。在細胞破碎前加入核酸酶效果更佳。在室溫下搖動或輕輕旋轉10-20分鐘。根據需要, 可以進一步優化酶促反應,找到最佳酶和底物之間的比例。
生物分析用樣品處理
在超活核酸酶 (50U/100μl) 的存在下,將裝有動物組織于緩沖液中的瓶子置于冰上進行超聲處理。每15分鐘重復一次。最后在750g和4℃溫度下離心5分鐘,去除殘留碎片。
南京納喆生物科技有限公司 版權所有(C) 蘇ICP備2023017246號-1
